近日,我校检验医学院“候鸟人才”鄢盛恺教授团队在生物电子传感类顶级期刊《Biosensors and Bioelectronics》(中科院一区Top期刊,影响因子12.6)上发表了题为“Rapid and multi-target genotyping ofHelicobacter pylori with digital microfluidics”的原创性高水平研究论文。该论文基于CRISPR-Cas12a系统结合数字微流体技术(DMF)成功建立了一种幽门螺杆菌(H. pylori)感染的早期诊断和感染菌株毒力分型的创新方法。我校检验医学院2021级硕士研究生刘锦嵩(排名第一)和北京理工大学医学技术学院符荣鑫副教授为该论文的共同第一作者,指导老师鄢盛恺教授、首都医科大学安贞医院杜杰教授和北京理工大学医学技术学院张帅龙教授为共同通讯作者,必赢线路检测3003附属医院为第一完成单位。
H.pylori感染与多种胃肠道疾病密切相关,尤其是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌以及胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等,对公共健康构成了重大威胁,其毒力与遗传多样性紧密相关,特别是毒力因子CagA和VacA直接影响其病原性和与胃癌发生的相关风险。鉴于现有H.pylori检测方法的多种局限性,开发一种快速、准确、便携且具有成本效益的检测系统对于提供准确的H.pylori诊断和有效的治疗策略至关重要。在此背景下,该研究团队建立了一种可以在早期发现H.pylori,并通过对毒力致病基因(cagA和vacA基因)的鉴定判断感染菌株毒力强弱的创新“即时检测”(POCT)方法,结合重组酶聚合酶扩增(RPA)与CRISPR-Cas12a基因编辑技术,在DMF平台上实现了对H.pylori的快速、准确、自动化和多重基因检测。该方法不仅提高了检测灵敏度和特异性,同时显著降低了检测的复杂性和成本。
相比传统基于CRISPR-Cas的分子诊断技术,该方法突破了单一标记检测的限制,能够在单个样本中同时检测三个靶基因,并可通过肉眼直接读出结果。与传统的PCR技术相比,本研究所开发的检测系统在实验室核酸自动化检测和分子POCT领域展现出优势,特别适用于资源有限或对快速诊断需求高的地区或应用场景。未来,DMF系统联合RPA-CRISPR检测因其潜在的兼容和稳定优势,有望被广泛应用于更多病原体的快速检测和分型。此外,研究团队还计划进一步优化该检测平台,以扩展其在其他临床样本中的应用范围,期望能够在未来实现转化应用,从而更广泛地服务于临床。
该研究得到国家重点研发计划、国家自然科学基金等项目的支持。(审核:一审李晓、二审上官腾飞、三审杨清玉,图文:检验医学院)
文章链接:https://doi.org/10.1016/j.bios.2024.116282。